а√天堂最新版在线,久久国产精品亚洲精品,成人无码区免费视频,亚洲精品乱码久久久久久按摩

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

瀏覽次數(shù):102發(fā)布日期:2024-07-25

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)澄瀏中路3404號(hào)

掃一掃  微信咨詢

©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問(wèn)量:93977 管理登陸

国产成人午夜福利高清在线观看| 萌白酱视频铁牛tv在线观看| 免费又A又黄又爽的视频| 日韩色视频网站| 日韩一区三区| 欧洲亚洲一区二区三区| 2019精品手机国产品在线| 交换夫妇在线看中文国产| 69tang亚洲精品嫩草| 国产欧美在线一区二区三区| 欧美日韩电影免费观看| 日产精品卡一卡二卡三视频| 国产成人亚洲精品无码电影不卡| 日韩亚洲中文字幕在线| 韩国资源视频一区二区三区| 日本高清不卡免费V视频| 国产一精品一AV一免费爽爽| 一二三四在线播放免费视频| 欧美FREESEX黑人又粗又大| 无码丰满熟妇一区二区| 野花高清在线观看免费3| 亚洲熟妇丰满XXXXX| 久久久久无码精品国产H动漫| 年轻的妈妈韩国伦理在线观看| 亚洲欧美日韩在线一区二区三区| 成 人 黄 色 网 站 在线播放视频| 日本一区二区三区不卡视频中文字幕| 日韩mv欧美mv国产免费| 亚洲性啪啪无码AV天堂| 久久久久久91| 长腿校花被啪到腿软| 男女一边摸一边做爽爽的免费阅读| 亚洲伊人久久综合影院 | 欧美日韩亚洲aaa| 久久免费午夜福利院| 欧美日韩色黄视频| 久久污| 中国老头和老妇TUBE| 欧美激情国产一区在线不卡| 一区二区三区欧美视频| 久久婷婷国产剧情内射白浆|